୪-ନାଇଟ୍ରୋଫିନାଇଲ୍ ବିଟା-ଡି-ଗାଲାକ୍ଟୋପାଇରାନୋସାଇଡ୍ CAS:200422-18-0

ପ୍ରଭାବ: ONPG ହେଉଛି ଏକ ସବଷ୍ଟ୍ରେଟ୍ ଯାହା ବିଶେଷ ଭାବରେ β-galactosidase ଏନଜାଇମର ଉପସ୍ଥିତି ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ। ଯେତେବେଳେ β-galactosidase ଏନଜାଇମ ଉପସ୍ଥିତ ଏବଂ ସକ୍ରିୟ ଥାଏ, ଏହା ONPG କୁ ଦୁଇଟି ଉତ୍ପାଦରେ ବିଭକ୍ତ କରେ: o-nitrophenol ଏବଂ ଏକ galactose ଡେରିଭେଟିଭ୍। o-nitrophenol ର ମୁକ୍ତି ଫଳରେ ଏକ ହଳଦିଆ ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତନ ହୁଏ, ଯାହାକୁ ଏକ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋଫୋଟୋମିଟର ବ୍ୟବହାର କରି ମାପ କରାଯାଇପାରିବ।

ପ୍ରୟୋଗ: ଆଣବିକ ଜୀବବିଜ୍ଞାନ ଏବଂ ଜୈବ ରସାୟନ ଗବେଷଣାରେ ONPG ର ଅନେକ ପ୍ରୟୋଗ ଅଛି:

β-galactosidase କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ନିର୍ଣ୍ଣୟ: ONPG ସାଧାରଣତଃ β-galactosidase ଏନଜାଇମର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ମାପ ଏବଂ ପରିମାଣ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ। o-naitrophenol ଗଠନର ହାର, ଯାହା ଏନଜାଇମ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସହିତ ସିଧାସଳଖ ସମାନୁପାତିକ, ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋଫୋଟୋମେଟ୍ରିକ୍ ଭାବରେ ମାପ କରାଯାଇପାରିବ।

ଜିନ୍ ପ୍ରକାଶନ ଏବଂ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ: ONPG ପ୍ରାୟତଃ ଜିନ୍ ପ୍ରକାଶନ ଏବଂ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଅଧ୍ୟୟନ ସହିତ ଜଡିତ ପରୀକ୍ଷଣରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ। ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରମୋଟରଙ୍କ ନିୟନ୍ତ୍ରଣରେ ଜିନ୍ ପ୍ରକାଶନ ଅଧ୍ୟୟନ କରିବା ପାଇଁ ସାଧାରଣତଃ ବ୍ୟବହୃତ lacZ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ ଭଳି ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ପରୀକ୍ଷାରେ ଏହା ପ୍ରାୟତଃ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ। ONPG ବ୍ୟବହାର କରି ମାପ କରାଯାଇଥିବା ବିଟା-ଗାଲାକ୍ଟୋସିଡେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଜିନ୍ ପ୍ରକାଶନର ସ୍ତର ବିଷୟରେ ଅନ୍ତର୍ଦୃଷ୍ଟି ପ୍ରଦାନ କରେ।

β-galactosidase କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ପାଇଁ ସ୍କ୍ରିନିଂ: ONPG କୁ ପୁନଃସଂଯୋଜିତ DNA ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟାରେ ଏକ କଲରିମେଟ୍ରିକ୍ ସ୍କ୍ରିନିଂ ପଦ୍ଧତି ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ ଯାହା β-galactosidase କୁ ଏନକୋଡ୍ କରୁଥିବା LacZ ଜିନର ଉପସ୍ଥିତି ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟକାରିତା ଚିହ୍ନଟ କରିପାରିବ। ଏହି ସ୍କ୍ରିନିଂ ପଦ୍ଧତି ଆଗ୍ରହର ଜିନ୍ ଧାରଣ କରୁଥିବା କ୍ଲୋନଗୁଡ଼ିକୁ ଚିହ୍ନଟ କରିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରେ।

ଏନଜାଇମ ଗତିବିଧି ଅଧ୍ୟୟନ: ONPG β-galactosidase ଏନଜାଇମର ଗତିବିଧି ଅଧ୍ୟୟନରେ ମଧ୍ୟ ଉପଯୋଗୀ। ବିଭିନ୍ନ ସବଷ୍ଟ୍ରେଟ୍ ସାନ୍ଦ୍ରତାରେ ଏନଜାଇମ-ସବଷ୍ଟ୍ରେଟ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ହାର ମାପିବା ଦ୍ୱାରା, ମାଇକେଲିସ୍-ମେଣ୍ଟେନ୍ ସ୍ଥିରାଙ୍କ (Km) ଏବଂ ସର୍ବାଧିକ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ହାର (Vmax) ଭଳି ଗତିବିଧି ପାରାମିଟର ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ସମ୍ଭବ।