Dithiothreitol (DTT) ଏକ ସାଧାରଣ ବ୍ୟବହୃତ ହ୍ରାସକାରୀ ଏଜେଣ୍ଟ, ଯାହାକୁ ନୂତନ ସବୁଜ ଯୋଗୀ ମଧ୍ୟ କୁହାଯାଏ |ଦୁଇଟି ମର୍କାପଟନ୍ ଗୋଷ୍ଠୀ (-SH) ସହିତ ଏହା ଏକ ଛୋଟ ମଲିକୁଲାର୍ ଜ organic ବ ଯ ound ଗିକ |ଏହାର ହ୍ରାସ ଗୁଣ ଏବଂ ସ୍ଥିରତା ହେତୁ, DTT ବାୟୋକେମିଷ୍ଟ୍ରି ଏବଂ ମଲିକୁଲାର ବାୟୋଲୋଜି ପରୀକ୍ଷଣରେ ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |
ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ବାୟୋମୋଲ୍ୟୁକୁଲ୍ସରେ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ହ୍ରାସ କରିବା ହେଉଛି DTT ର ମୁଖ୍ୟ ଭୂମିକା |ଡିସୁଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଫୋଲ୍ଡିଂ ଏବଂ ସ୍ଥିରତାର ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଅଂଶ, କିନ୍ତୁ କେତେକ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଅବସ୍ଥାରେ ଯେପରିକି ହ୍ରାସ ଯୋଗ୍ୟ SDS-PAGE ବିଶ୍ଳେଷଣ, ପ୍ରୋଟିନ୍ ପୁନର୍ବିନ୍ୟାସ ଏବଂ ଫୋଲ୍ଡିଂ, ଡିସଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡକୁ ଦୁଇଟି ଥାଇଲ ଗ୍ରୁପରେ ହ୍ରାସ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ | ପ୍ରୋଟିନ୍DTT ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ସହିତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା କରିପାରିବ ଯାହା ସେମାନଙ୍କୁ ମର୍କାପଟାନ୍ ଗୋଷ୍ଠୀରେ ହ୍ରାସ କରିବ, ଏହିପରି ପ୍ରୋଟିନର ସ୍ଥାନିକ ଗଠନ ଖୋଲିବ ଏବଂ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଏବଂ ପରିଚାଳନା କରିବା ସହଜ ହେବ |
ଏନଜାଇମ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ ସ୍ଥିରତା ରକ୍ଷା ପାଇଁ DTT ମଧ୍ୟ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ |କେତେକ ଏନଜାଇମ୍-କାଟାଲାଇଜଡ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ, ଅକ୍ସିଡାଣ୍ଟ ଦ୍ୱାରା ଏନଜାଇମର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ହ୍ରାସ ହୋଇପାରେ |DTT ଅକ୍ସିଡାଣ୍ଟ ସହିତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଶୀଳ ହୋଇପାରେ ଯାହା ସେମାନଙ୍କୁ କ୍ଷତିକାରକ ପଦାର୍ଥରେ ହ୍ରାସ କରିଥାଏ, ଯାହାଦ୍ୱାରା ଏନଜାଇମର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ ସ୍ଥିରତା ରକ୍ଷା କରାଯାଇଥାଏ |
ପାରମ୍ପାରିକ ହ୍ରାସକାରୀ ଏଜେଣ୍ଟଗୁଡିକ ତୁଳନାରେ β-mercaptoethanol (β-ME) ତୁଳନାରେ, DTT ଏକ ନିରାପଦ ଏବଂ ଅଧିକ ସ୍ଥିର ହ୍ରାସକାରୀ ଏଜେଣ୍ଟ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଏ |ଏହା କେବଳ ଜଳୀୟ ସମାଧାନରେ ସ୍ଥିର ନୁହେଁ, ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରା ଏବଂ ଏସିଡ୍-ବେସ୍ ଅବସ୍ଥାରେ ଏହାର ହ୍ରାସ ଗୁଣକୁ ମଧ୍ୟ ବଜାୟ ରଖେ |
DTT ର ବ୍ୟବହାର ଅପେକ୍ଷାକୃତ ସରଳ |ସାଧାରଣତ ,, DTT ଏକ ଉପଯୁକ୍ତ ବଫରରେ ଦ୍ରବୀଭୂତ ହୁଏ ଏବଂ ତା’ପରେ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ସିଷ୍ଟମରେ ଯୋଡା ଯାଇଥାଏ |ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପରୀକ୍ଷଣ ଅନୁଯାୟୀ DTT ର ସର୍ବୋଚ୍ଚ ଏକାଗ୍ରତା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯିବା ଆବଶ୍ୟକ, ଏବଂ ସାଧାରଣତ 0.1 0.1-1mM ପରିସର ମଧ୍ୟରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |ନିମ୍ନ ଏକାଗ୍ରତା କୋଷ ବୃଦ୍ଧି ଉପରେ ପ୍ରତିକୂଳ ପ୍ରଭାବକୁ ହ୍ରାସ କରିପାରେ ଏବଂ ଲକ୍ଷ୍ୟ ପ୍ରୋଟିନ୍ଗୁଡ଼ିକର ଅତ୍ୟଧିକ ସଙ୍କୋଚନ ହେତୁ ସାଇଟୋଟକ୍ସାଇସିଟି ହ୍ରାସ କରିପାରେ |ଅଧିକ ଏକାଗ୍ରତା କୋଷର ମେଟାବୋଲିକ୍ ବୋ burden ସୃଷ୍ଟି କରିପାରେ, କୋଷର ବୃଦ୍ଧି ଏବଂ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ଦକ୍ଷତା ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇପାରେ |
ସର୍ବୋଚ୍ଚ ଏକାଗ୍ରତା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବାର ଉପାୟ ହେଉଛି ବିଭିନ୍ନ ଏକାଗ୍ରତାରେ IPTG ଇନଡକ୍ସନ୍ ପରୀକ୍ଷଣ କରି ଲକ୍ଷ୍ୟ ପ୍ରୋଟିନର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ସ୍ତରର ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ |ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର IPTG ଏକାଗ୍ରତା (ଯଥା 0.1 ମି। ବ୍ଲଟ୍ କିମ୍ବା ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ଚିହ୍ନଟ) |ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଫଳାଫଳ ଅନୁଯାୟୀ, ସର୍ବୋତ୍ତମ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ପ୍ରଭାବ ସହିତ ଏକାଗ୍ରତାକୁ ସର୍ବୋଚ୍ଚ ଏକାଗ୍ରତା ଭାବରେ ଚୟନ କରାଯାଇଥିଲା |
ଏହା ସହିତ, ସମାନ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଅବସ୍ଥାରେ ସାଧାରଣ ବ୍ୟବହୃତ IPTG ଏକାଗ୍ରତା ପରିସରକୁ ବୁ to ିବା ପାଇଁ ଆପଣ ସମ୍ପୃକ୍ତ ସାହିତ୍ୟ କିମ୍ବା ଅନ୍ୟ ଲାବୋରେଟୋରୀଗୁଡିକର ଅଭିଜ୍ଞତାକୁ ମଧ୍ୟ ଅନୁସରଣ କରିପାରିବେ, ଏବଂ ତାପରେ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଆବଶ୍ୟକତା ଅନୁଯାୟୀ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ ଏବଂ ଆଡଜଷ୍ଟ କରିପାରିବେ |
ଏହା ଧ୍ୟାନ ଦେବା ଜରୁରୀ ଯେ ବିଭିନ୍ନ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ପ୍ରଣାଳୀ, ଲକ୍ଷ୍ୟ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏବଂ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଅବସ୍ଥା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରି ସର୍ବୋଚ୍ଚ ଏକାଗ୍ରତା ଭିନ୍ନ ହୋଇପାରେ, ତେଣୁ କେସ୍-କେସ୍ ଆଧାରରେ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ କରିବା ସର୍ବୋତ୍ତମ |
ସଂକ୍ଷେପରେ, DTT ହେଉଛି ସାଧାରଣତ used ବ୍ୟବହୃତ ହ୍ରାସକାରୀ ଏଜେଣ୍ଟ ଯାହା ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ବାୟୋମୋଲ୍ୟୁକୁଲରେ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡକୁ ହ୍ରାସ କରିବା ଏବଂ ଏନଜାଇମ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ ସ୍ଥିରତା ରକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରେ |ବାୟୋକେମିଷ୍ଟ୍ରି ଏବଂ ମଲିକୁଲାର ବାୟୋଲୋଜି ପରୀକ୍ଷଣରେ ଏହା ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଛି |
ପୋଷ୍ଟ ସମୟ: ସେପ୍ଟେମ୍ବର -28-2023 |